·- ~ '.:., ~ "/ ... • \ 1 UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA "SEROTIPIFICACIÓN V SENSIBILIDAD ANTIMICROBIANA DE Escherichia coli AISLADOS DE SUPERFICIES VIVAS E INERTES EN PUESTOS DE VENTA DE CARNE DE AVE EN EL MERCADO DE CIUDAD DE DIOS, LIMA" TESIS para optar por el título de Médico Veterinario Zootecnista AUTOR ELINOR SALAZAR VICENTELO BACHILLER DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA DIRECTOR MV. Siever Morales Cauti Lima-Perú 2014 Serotipificación y Sensibilidad Antimicrobiana de Escherichia coli Aislados de Superficies Vivas e Inertes en Puestos de Venta de Carne de Ave en el Mercado de Ciudad de Dios, Lima. Proyecto de Investigación de Enterobacterias (UCSUR- UNAM) Laboratorio de Microbiología, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Científica del Sur Unidad de Investigación Básica, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de México RESUMEN Las ETAs a nivel mundial tienen como uno de los agentes etiológicos más importantes en actividades de expendio a Escherichia coli, representando un importante riesgo para la salud pública. En el presente estudio se analizó muestras provenientes de superficies vivas (manos de los trabajadores) e inertes (tabla de picar y mesas de expendio) de 50 puestos de venta de carne de pollo del Mercado Cooperativo Ciudad de Dios del distrito de San Juan de Miraflores. El muestreo utilizó hisopos estériles y medio Stuard como medio de transporte bacteriano, para el enriquecimiento se utilizó caldo de tripticasa de soya y el aislamiento se desarrolló en agar Me conkey, obteniéndose colonias lactosa positivas típicas de E. coli, alas que a través de pruebas bioquímicas estándar, como fermentación de glucosa, lactosa; producción de ácido de la glucosa (Rojo de Metilo), producción de ureasa, Vorges Proskauer, fenil-alanina, movilidad, utilización de malonato y citrato de Simmons; descarboxilación de arginina, lisina y ornitina; oxidación del ácido glucónico. La serotipificación se llevó a cabo mediante el método de Kauffman para detectar el antígeno somático (0), y flagelar (H), determinando la sensibilidad antimicrobiana por el método de disco difusión (Kirby- Bauer).Se obtuvieron 38% (57/150) de muestras positivas para E. coli, identificándose 40 serotipos diferentes; de los cuales el 06Hlü fue el de mayor frecuencia (10.53%), resultando sensibles a Gentamicina y resistentes a Tetraciclina, Fosfomicina, Sulfatrimetoprim, Estreptomicina. ABSTRACT Onc of the most importants etiologic agents around the world in activities of expenditure is Escherichia coli representing a risk for the public health. In this study, 150 samples were analyzed, 50 from the worker' s hands, 50 from the table of stinging and 50 from the table of cxpenditure. The totality of the samples were obtained of the Ciudad de Dios market situated in San Juan de Miraflores, Lima, Perú, where we found 38% samples positives for E. coli and 40 diffcrcnt serotypes. The 06H 1O serotype were founded with mayor frecuency (1 0.53%). For the sampling method sterile swabs were used as means Stuard bacteria! transport medium, trypticase soy broth (Merck) was used as a means of enriching medium, isolation was developed in Me Conkey agar, where lactose positive colonies typical of E. coli were found, which was checked with standard biochemical tests such as a fermentation of glucose, lactose; acid production from glucose (Methyl Red), urease, proskauer vorges, catalasc test, oxidase, Simmons citrate utilization; sugars three iron (TSI), lysine iron (LIA), hydrogen sulfide - índole - motility (SIM), gluconate, ornithine. Serotyping was performed by thc method of Kauffman to detect somatic antigen (O) and the flagellar (H), and for antimicrobial susceptibility werc used the diffusion method disk (Kirby-Bauer), which was determined that the isolation Escherichiacoli positive were sensitive to gentamicin and resistant for tetracycline, fosfomycin, sulfatrimetoprim, streptomycín. ÍNDICE R.esumen .............................................................................................. i Introducción .......................................................................................... 1 l. Marco de referencia 1.1 Antecedentes ....................................................................... 2 1.2 Escherichia coli .................................................................... 3 1.2.1 Morfología ........................................................................... 4 1.2.2 Clasificación taxonómica ................................................... 5 1.2.3 Patotipos ........................................................................ 6 1.2.4 Serotipos ........................................................................ 8 1.2.5 Genética bacteriana .......................................................... 12 1.2.6 Mecanismo de transmisión ................................................. 14 1.2. 7 ET As y contaminación cruzada ............................................. 15 1.2.8 Fisiopatología 1.2.8.1 Dosis infectiva .......................................................... 17 1.2.8.2 Periodo de incubación .................................................. 17 1.2.8.3 Mecanismo de patogenicidad ......................................... 18 1.2.9 Toxicidad y virulencia ....................................................... 21 1.2.9.1 Toxinas 1.2.9.1.1 Toxinas shiga .................................................... 22 1.2.9.1.2 Toxinas LT y ST ............................................... 22 1.2. 9 .1.3 Intimina ............................................................... 23 1.2.9.1.4 Toxinas VT1 y VT2 ............................................... 24 1.2.9.1.5 Toxina Citoleta!Distendida ...................................... 25 1.3 Sensibilidad Antimicrobiana ............................. , ......................... 25 I l. Materiales y métodos 2.1 Población y muestra .................................................................. 28 2.2 Procesamiento de muestras .................................................................... 28 III. Resultados .................................................................................... 36 IV. I)iscusión ...................................................................................... 42 V. Conclusiones .................................................................................. 48 VI. Recomendaciones ............................................................................ 49 VII. Anexos ........................................................................................ 50 VIII. Bibliografía ................................................................................... 61