,. 1 ' ' ,. SUR UNIVERSIDAD CIENTIFICA DEL SUR FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS Y BIOLOGICAS "DETERMINACION DEL PATRON DE BANDAS GENETICAS DE CEPAS DE Salmonella Typhimurium AISLADAS DE CUYES UTILIZANDO LA TECNICA DE ELECTROFORESIS EN GEL DE CAMPOS PULSADOS" Tesis para optar por el Título de MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA Massimo Delli-Rocili Dileo BACHILLER EN MEDICINA VETERINARIA Y WOTECNIA LIMA-PERU 2014 CONTENIDO RESUMEN ........................................................................................... .! I. INTRODUCCION ................................................................ 1 II. REVISION DE LITERATURA ................................................ 4 2.1 Caracteristicas del genero Salmonella .................................... .5 2.2 Taxononlia ..................................................................... 5 2.3 Factores de Virulencia ....................................................... 7 2.3.1 Islas de Patogenicidad. ................................................ 7 2.3.2 Sistemas de Secreción ................................................. 8 2.3.3 Antígenos Flagelares y Somaticos ................................... 9 2.3 .4 Motilidad Bacteriana .................................................. 1O 2.3.5 Biopeliculas (Bio:films) ............................................... 10 2.3.6 Resistencia a Antibióticos ............................................ 11 2.4 Cepas de Salmonella ...................................................... ... 12 2.5 Epidemiología ................................................................ 14 2.6 Enfermedades trasmitidas por los alimentos (ETA) ..................... 16 2. 7 Programas de vigilancia en latinoamerica ................................ 17 2.8 Electroforesis de campos pulsados ........................................ 18 2. 9 Electroforesis de campo pulsado vía CHEF ............................... 19 2.9.1 Factores que afectan la resolución ...................................2 0 3.0 Consideraciones especiales ................................................. 22 3.1 Enzimas de restricción ...................................................... .22 III. MATERIALES Y METODOS ................................................. .24 IV. RESULTADOS ...................................................................2 9 V. DISCUSION .......................................................................3 4 VI. CONCLUSIONES ................................................................ 38 VIL RECOMENDACIONES ..........................................................3 9 VIII. BIBLIOGAFIA .................................................................... 40 IX. ANEXOS ........................................................................... 52 RESUMEN Salmonella Typhimuirum es un bacilo gramnegativo generalmente móvil por flagelos, no espomlado que posee antígenos somático y flagelares serotipificables; se le relaciona con la salmonelosis que afecta de forma significativa a los cuyes y otras especies animales; en los cuyes producen cuadros clínicos, desde agudos a crónicos, con daftos en diferentes sistemas: respiratorios, digestivos, nerviosos, reproductivos o potencialmente septicemia y muerte, sin distinción de edad, sexo o raza. El presente estudio se utilizó 46 cepas obtenidas de cuyes con infección natural, procedentes de diferentes regiones del Perú, las cuales fueron serotipificadas empleando el esquema antigénico de Kauffinann-White con sueros especificas contra los antígenos somáticos y flagelares de fase 1 y fase 2. Se utilizó la técnica de electroforesis en gel de campos pulsados (PFGE) usando la enzima de restricción Xbal con ello se obtuvo el patrón de bandas génicas. El análisis de tipificación serológicas mostro que 44 (96 %) de 46 cepas fueron serotipificadas como Salmonella Typhimurium con fórmula antigénica 04,12:i: 1,2, las cuales fueron agmpadas en 8 Pulsotipos diferentes en base al perfil de bandas génicas encontradas, para luego ser agmpadas en 4 Clusters de acuerdo a su porcentaje de similitud. Los resultados permitieron determinar que más del 75% de las cepas estudiadas provienen de una misma clona (pulsotipo A y A 1) , que podría explicar el origen del brote inicial en la región de Aquia. Palabras Claves Salmonella Typhimurium, Cuyes, PFGE, Xbal